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移液器使用、校准和管理的标准操作规程
【目的】

本规程规定了移液器使用、校准和管理的标准操作规程,使操作人员和移液器的管理人员能够有章可循,保证移液器的使用、校准和管理符合GLP规范的要求。

【规程】

1 移液器的使用

1.1选择量程合适的移液器:移液器只能在特定量程范围内准确移取液体,如超出最低或最大量程,会损坏移液器并导致计量不准;

1.2 设定容量值

1.2.1 粗调:通过调节旋钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值;

1.2.2 细调,当容量值接近设定值以后,应将移液器刻度显示窗平行放至自己的眼前,通过调节旋钮慢慢地将容量值调至预想值,从而避免视觉误差所造成的影响;

1.2.3 设定容量值时的注意事项:在调节量程时,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可。但如果要从小体积调为大体积时,则应先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的最高精确度。在设定容量值的过程中,禁止将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液器。

1.3吸液嘴(枪头)的装配:把白套筒顶端插入吸液嘴,在轻轻用力下压的同时,把手中的移液器按逆时针方向旋转至吸液嘴卡紧。切记用力不能过猛,更不能采取剁吸头的方法来进行安装。吸液嘴卡紧的标志是略为超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。;

1.4预洗吸液嘴:在安装了新的吸液嘴或增大了容量值以后,应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次,确保移液工作的精度和准度;

1.5吸液:先将四指并拢握住移液器上部,用拇指按住塞杆顶端的按钮,向下按到第一停点,再将吸头垂直浸入液面2~3mm,缓慢平稳松开按钮,吸上液体,并停留1~2秒钟(粘性大的溶液可加长停留时间);

1.6 移液:缓慢抬起移液器取出吸液嘴,确保吸液嘴外壁无残留液体。可用定性滤纸抹去吸嘴外面可能黏附的液滴。小心勿触及吸液嘴口;

1.7 目测吸入的液体体积是否合理;

1.8 放液:将吸液嘴贴到容器内壁并保持20°-40°倾斜,平稳地把按钮压到第一停点,停1-2s(粘性大的液体要加长停留时间)后,继续按压到第二停点,排出残余液体。松开按钮,然后将吸液嘴沿着内壁向上移开;

1.9 按吸头弹射器除去吸头,吸取不同样本液体时必须更换吸头;

2 移液器的校准

2.1 为保证取样的准确性,移液器应定期校准,本中心规定移液器一年校准二次,二次间隔不超过7个月,由后勤保障部统一完成。最大量程小于10μL的移液器送有资质的单位校准;

2.2 计量性能要求:移液器在标准温度20℃时,其容量允许误差和测量重复性应符合表1的要求;

2.3 校准条件

2.3.1 校准环境:移液器应在室温为(20±5)℃之间,且室温变化不得大于1℃/h的条件下进行;

2.3.2 校准介质:使用超纯水,提前24h放入实验室内,使其温度与室温温差不得大于2℃;

2.3.3 校准设备:主要设备必须经法定技术机构鉴定合格且在鉴定周期内。电子天平(测量范围200g;分度值0.1mg);温湿度表;温度计(测量范围(0~50)℃;分度值0.1℃);烧杯(50ml)1个;烧杯(100ml)1个;定性滤纸若干小块(经恒温处理);

2.4 校准方法

2.4.1 打开电子天平,空载调零;将温度计放置在盛放超纯水的器皿内;

2.4.2 放入小烧杯待天平显示稳定后,按下归零键归零。给移液器上安装相应的吸液嘴,对移液器的枪头进行预洗,在移液器校准记录表上记录当前的环境温湿度;

2.4.3 将移液器的容量调至被检点;

2.4.4 垂直的握住移液器,将按钮旋转至检定位置,此时将吸液嘴侵入装有超纯水的容器内,并保持在液面下1~3mm处,缓慢放松按钮,等待1s~2s后离开液面,如吸液嘴占有多余液体,则使用定性滤纸吸干(小心勿触及吸液嘴口);

2.4.5 将吸液嘴流液口靠在天平秤盘上的烧杯内壁,并与其成大约45°角,缓慢地把按钮按至第一停止点,等待1s~2s后再将按钮快速完全按下,然后将吸液嘴沿着称量杯的内壁向上移开。

2.4.6 待天平显示稳定后,马上读取并在移液器校准记录表上记录此时电子天平显示出的数值。记录完毕将电子天平复零;

2.4.7 重复5次执行(4)~(6)条。记录完毕,将移液器的容量调至下一被检点继续。被检点遵循从小到大的原则进行调整;

2.5 数据处理

2.5.1 移液器实际容量计算:将所测得的质量值带入以下公式,求得移液器在标准温度20℃时的实际容量值;

 

式中:V20 ——标准温度20℃时的移液器的实际容量,mL;

m ——被检移液器所排出的超纯水质量, g;

K(t) ——测定值m和测定时超纯水温度的比例系数,列于附录2中;

2.5.2 移液器的容量相对误差计算:将换算得到的实际容量值带入以下公式,求得移液器在标准温度20℃时的容量相对误差;

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式中:V ——标称容量,μL;

——5次测量的算数平均值,μL;

2.5.3 移液器的容量重复性计算:将换算得到的实际容量值带入以下公式,求得移液器在标准温度20℃时的容量重复性;

1.jpg

式中:σn-1 ——标准偏差;

n ——测量次数;

S ——重复性;

2.5.3 将计算结果填写在移液器校准记录表上,并给出校准结论。

2.6 校准结果处理

2.6.1经校准合格的移液器贴上校准合格证标识,注明校准编号、单位、日期及有效期。校准编号格式由ZJ年度-移液器编号-本年度校准次数组成,如2009年001号移液器的第一次校准的号为ZJ09-001-01,此标识于每次校准后更换;

2.6.2 如测试的3个量程有1个量程的容量允许误差和测量重复性超出表1要求,应清洗、修正并重新校准。重新校准仍不合格的,退回厂家修理或作废弃处理;

2.7 移液器的修正

2.7.1 将移液器调整至最小量程,按照校准方法得到当前的实际容量值,根据与标示容量值的差值,通过移液器上的调准旋钮进行调整;

2.7.2 当调整后测得的实际容量值与标示容量值符合表1要求时,将移液器容量调整至中间量程继续测量。中间量程符合要求时,再调整至最大量程继续测量。

2.7.3如果中间量程或者最大量程有一个不符合表1要求时,则需重新调整至最小量程继续修正。直到3个量程的值都符合表1要求为止。

2.7.4 修正完毕的移液器,需重新进行校准。

2.7.5 最小量程低于10μL的,不进行修正。如果最大量程和中间量程符合校准要求的,继续使用,否则返厂维修。

3 移液器的使用注意事项

3.1 如长时间不使用,要把移液枪的量程调至最大值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧;

3.2 定期清洁移液枪外壁,可以用95%酒精或60%的异丙醇,再用蒸馏水擦拭,自然晾干;

3.3 使用时要检查是否有漏液现象。方法是吸取液体后悬空垂直放置几秒中,看看液面是否下降。如果漏液,则检查吸液嘴是否匹配和弹簧活塞是否正常;

3.4 当移液器吸嘴内有液体时,严禁将移液器水平或倒置放置,以防液体流入活塞室腐蚀移液器活塞;